实时荧光定量PCR的个体重复问题做实时荧光定量的个体重复时,能将几个个体的cDNA混在一起做吗?这样算做重复了吗?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/30 08:47:28
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实时荧光定量PCR的个体重复问题做实时荧光定量的个体重复时,能将几个个体的cDNA混在一起做吗?这样算做重复了吗?
实时荧光定量PCR的个体重复问题
做实时荧光定量的个体重复时,能将几个个体的cDNA混在一起做吗?这样算做重复了吗?
实时荧光定量PCR的个体重复问题做实时荧光定量的个体重复时,能将几个个体的cDNA混在一起做吗?这样算做重复了吗?
楼主这个问题在实验设计方面是很基础很重要的.混合几个个体的cDNA来做是不可取的,一楼答得对,但所谓“大家不是很认可”不是一个科学的理由.
在比较不同组的差异时,楼主确实需要取几个个体的平均值,但是还有一些重要的信息,是只有在每个个体独立分别PCR定量时,才能够获取的:
方差.这表示几个个体之间的差异.1,2,3,4 这四个个体同3,4,5,6这四个个体相比较,均值是2.5比4.5;2.3,2.4,2.6,2.7 比较 4.3,4.4,4.6,4.7,均值也是2.5比4.5.但是前两组方差都很大,后两组方差小得多.用统计学的方法来看,前两组的差异不大,不是显著的差异,而后两组则是存在着显著的差异.
离群值.这表示同一组的几个个体之中,有一个/几个非常特殊,数值与其他个体相差很大的,不能够代表这个组而在数据分析时需要剔除的.比如1,4,4.2,4.4这四个个体同3.1,3.3,3.5,3.7这四个个体来比较.如果只看均值,为3.4比3.4,无任何差别.而如果能够看到每个个体的数值,你就会剔除1这个离群值,得到前一组数值高于后一组,这个完全不同的结论.
所以把几个个体混合起来做,是不能够得到正确的有效解决科学问题的实验结果的.
最好是不要,这样会减小重复之间的误差。特别是需定量的样品,混样对定量结果的准确性是有影响的