如果一个PCR反应凝胶检查后,除了目标条带外还出现淡淡的杂带,分析其原因,如何通过
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/02 07:45:23
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如果一个PCR反应凝胶检查后,除了目标条带外还出现淡淡的杂带,分析其原因,如何通过
如果一个PCR反应凝胶检查后,除了目标条带外还出现淡淡的杂带,分析其原因,如何通过
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这个有很多原因的!最大的原因也是最常见的原因是:1模板不纯,二引物特异性不高,三:退火温度偏低.第四:酶的活性过高,五镁离子浓度不适
解决的办法有:1:将模板稀释,2:提高退火温度或者递减PCR,3:降低PCR各个组分的量,如酶的量减半,引物和DNTP的量也减半 4:重新设计引物
退火温度低了 引物特异性不好
看一下杂带的分子量多少bp,一般PCR条带多的话会是引物或模板加的不合理
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