AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/02 00:56:53
![AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发](/uploads/image/z/12574765-37-5.jpg?t=AFLP%E9%80%89%E6%8B%A9%E6%80%A7%E6%89%A9%E5%A2%9E+%E8%BF%99%E6%98%AF%E6%80%8E%E4%B9%88%E5%9B%9E%E4%BA%8B%E5%95%8A%21%E9%A2%84%E6%89%A9%E5%A2%9E%E5%B7%B2%E7%BB%8F%E7%9C%8B%E5%88%B0%E7%89%87%E6%AE%B5%E5%9C%A81000bp%E4%BB%A5%E4%B8%8B%E6%9C%89%E6%89%80%E5%AF%8C%E9%9B%86%2C%E5%8F%AF%E6%98%AF%E5%9C%A8%E9%A2%84%E6%89%A9%E5%BC%95%E7%89%A93%E2%80%98%E7%AB%AF%E5%8A%A0%E4%B8%8A%E9%80%89%E6%8B%A9%E6%80%A7%E7%A2%B1%E5%9F%BA%E5%90%8E%2C%E6%80%8E%E4%B9%88%E6%98%BE%E5%BE%97%E6%89%A9%E5%A2%9E%E5%88%B01000bp%E4%BB%A5%E4%B8%8A%E5%8E%BB%E4%BA%86%21%E8%BF%98%E6%9C%89%2C%E5%A4%A7%E5%AE%B6%E7%9A%84ECOR1%E5%92%8CMSE1%E7%9A%84%E6%8E%A5%E5%A4%B4%E5%BA%8F%E5%88%97%E5%8F%AF%E4%B8%8D%E5%8F%AF%E4%BB%A5%E5%8F%91)
AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
AFLP选择性扩增
这是怎么回事啊!
预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!
还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发上来大家核对一下啊.
我的是5=》3
Ecor1接头上链 CTCGTAGACTGCGTACC
Ecor1接头下链 AATTGGTACGCAGTCTAC
Mse1接头上链 GACGATGAGTCCTGAG
Mse1接头下链 TACTCAGGACTCAT
还有就是大家在合成接头时,是不是也是65度水浴10min,在室温下放置2个小时?然后4°冰箱保存下?
MARKER是2000的
AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
我觉得你在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,pcr应该更难拉出片段,不可能比第一次拉的还要长.我觉得这是跑胶的原因,你每次用的dna loading的不同,电泳缓冲液的不同都会导致结果会变一变,我建议你把第一次预扩增的产物和第二次预扩增的产物同时跑下胶,看是不是还是偏大.
我没有做过AFLP,只是根据我的经验推理的,因此你的第二个问题回答不了,建议你去看看分子克隆的标准protocol.
AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发
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