ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/27 20:46:01
![ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引](/uploads/image/z/12326586-42-6.jpg?t=ISSR%E4%B8%BA%E4%BB%80%E4%B9%88%E6%89%A9%E5%A2%9E%E4%B8%8D%E5%87%BA%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E6%88%91%E7%8E%B0%E5%9C%A8%E5%81%9A%E7%9A%84%E6%98%AFISSR-PCR%2C%E4%BD%93%E7%B3%BB%E9%83%BD%E5%B7%B2%E7%BB%8F%E4%BC%98%E5%8C%96%E5%AE%8C%E6%88%90%2C%E6%9B%BE%E7%BB%8FP%E5%87%BA%E4%BA%86%E8%BE%83%E5%A5%BD%E7%9A%84%E5%B8%A6%2C%E4%BD%86%E6%98%AF%E6%9C%80%E8%BF%91%E4%B8%8D%E7%9F%A5%E4%BB%80%E4%B9%88%E5%8E%9F%E5%9B%A0%2C%E5%A5%BD%E5%A4%9A%E6%97%B6%E5%80%99%E9%83%BD%E6%98%AF%E7%99%BD%E6%9D%BF%E6%97%A0%E5%B8%A6%2C%E5%8F%AA%E6%9C%89Marker%E5%BE%88%E6%B8%85%E6%99%B0.25ul%E5%8F%8D%E5%BA%94%E4%BD%93%E7%B3%BB%E4%B8%AD%2C%E5%8A%A0%E5%85%A5%E6%A8%A1%E6%9D%BFDNA+1ul+%285ng%29ISSR%E5%BC%95)
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
ISSR为什么扩增不出条带
我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.
25ul反应体系中,加入
模板DNA 1ul (5ng)
ISSR引物 1ul (约5pmol)
10xPCR Buffer 2.5ul 内含镁离子
dNTP 1ul (2.5mM)
Taq酶 1单位(U)
加ddH2O 至 25ul
PCR退火温度在48-56之间.Taq酶,dNTP是新的,模板也重新提过,跑总DNA条带也很亮,用的引物别人拿去可以扩增.我现在做大多数时候都是白板无带,我很郁闷,
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
可能是小问题导致,比方说你的EP管里是不是有杂质,你的加样枪是不是漏气什么的……实验做不出来就要怀疑一切,包括你的试剂是不是被别人动过了
建议同样的体系,请别人替你做一遍,看看能不能出来结果
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
一个引物PCR扩增出的多个条带为什么亮度会不同?用ISSR标记分析遗传多样性,一个引物的PCR扩增结果可以有多个条带,为什么有的条带很亮,有的条带就不太亮?
关于ISSR引物我现在打算做ISSR扩增,我有100个样品,但是不知道该购买多少引物,以及该买哪些序列的引物,希望大家能帮帮忙给个意见,我的100个是我提的DNA样品,不是引物。我还没买引物,你的
基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因?
pcr扩增没有条带我用别人肯定能作出来的ISSR体系扩增之后为什么什么条带都没有呢,感觉药品应该没有问题.将DNA稀释100倍后用紫外分光光度计测DNA od260/280 1.8左右,符合要求呀,电泳检测只是轻
ISSR标记,总是扩增不出来,我做ISSR标记,下面是我提取基因组DNA的图片,我曾经用这些模板扩出来比较好的条带来,可是等我把所有样品的DNA全提取完成,再去做PCR的时候,就发现问题严重了.有时候
ISSR扩增的多态性条带怎么统计?如用10 个ISSR 引物共扩增到600 条带,其中多态 性条带有250 条,请问这个总带数600和多态性条带的300是如何统计的?即哪些属总带统计的范围,哪些属多态性带统计
现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来回收的片段1K左右
PCR扩增不出来条带的原因?
T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到
PCR ISSR 条带很少,而且不清楚看文献上做的很多条带,同样体系为啥,我的就最多4调
我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因.另外一个真菌能扩增出来条带
做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果
PAGE电泳条带该如何分析?这是我用MSAP(甲基化敏感扩增多态性)跑出的PAGE电泳条带,感觉条带很不清晰背景色也很重。不知道该如何分析希望各位大虾指导。不甚感激!
PCR 空白都能P出来 是怎么回事?我用 338f 518r 扩增 16S rDNA V3片段 为什么 不加DNA模板 都能P出很亮的条带,是因为污染了吗,可是我尽量保证无菌(在无菌操作台操作,没在无菌室操作)做了很多次
PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物总是扩增不出来,目的片段279bp,我用的条件是94℃,5min;94℃,30s,50℃,30s,72℃,45s,30个循环;72℃,5min.其中退火温度有试过56℃,58℃,都不行,只有引
如何增加PCR产物?我得PCR扩增循环数是30个,扩增体系是15微升,其中NTP的浓度是1.5,引物和酶都是1,模板是1.2,镁离子的浓度是1.0.能扩出目的条带,但是琼脂糖电泳条带不是很亮,即目的条带的量不
mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带 要不就是有拖带 这种情况是怎么回事